El potencial tóxico de un extracto acuoso liofilizado fue evaluado mediante el ensayo de toxicidad aguda oral y subcrónica a 90 días en ratas Wistar de ambos sexos. Los métodos empleados fueron los descritos por las normas OECD. En el ensayo agudo se administró por vía oral la dosis de 2000 mg/kg y en el ensayo subcrónico 250, 500 y 1000 mg/kg/día durante 13 semanas. Se evaluaron los signos tóxicos y peso corporal en ambos ensayos. En el estudio subcrónico además se evaluó el consumo de alimentos, indicadores hematológicos (hemoglobina, hematocrito, recuento diferencial de leucocitos, recuento total de leucocitos y recuento total de eritrocitos) y bioquímica clínica (glucosa, alanino amino transferasa, aspartato amino transferasa, colesterol, urea, bilirrubina y creatinina). También se realizó necropsia y examen histopatológico de órganos y tejidos (corazón, riñón, hígado, bazo, cerebro, pulmón, estómago, intestino, timo, glándulas suprarrenales, tiroides, paratiroides, páncreas, glándulas salivales, ganglio cervical, testículos, vesículas seminales, próstata y ovarios) y se determinó el peso relativo de órganos (corazón, riñón, hígado, bazo, cerebro, pulmón, timo, glándulas suprarrenales, próstata, testículos y ovarios). No se apreciaron signos tóxicos ni mortalidad como consecuencia de la administración del liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. en ninguno de los ensayos. Los parámetros analizados de peso corporal, consumo de alimentos, hematología, bioquímica, peso relativo de órganos y análisis histopatológico de órganos y teji- dos no evidenciaron toxicidad significativa atribuible a la sustancia de prueba.
The toxic potential of a lyophilized aqueous extract was evaluated by oral acute and 90 days subchronic toxicity in Wistar rats of both sexes. The methods used were those described by OECD guidelines. In an oral acute toxicity test, a dose of 2000 mg/kg and for subchronic toxicity test, doses of 250, 500 and 1000 mg/kg/day for 13 weeks were administered. The toxic signs and corporal weight were evaluated for both assays. In addition, in subchronic toxicity test, the food consumption, haematology (haemoglobin, haematocrit, erythrocyte count, total and differential leucocyte count) and clinical biochemistry determination (glucose, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, cholesterol, urea nitrogen, total bilirubin and creatinine) were evaluated. Gross necropsy and histopathological examination of organs and tissues (heart, kidney, liver, spleen, brain, lung, stomach, intestine, thymus, adrenals, thyroid/parathyroid, pancreas, salivary glands, cervical ganglion, testicles, seminal vesicles, prostate and ovaries) were carried out and relative weight of each organ was determined (heart, kidney, liver, spleen, brain, lung, thymus, adrenals, prostate, testicles and ovaries). Oral acute and subchronic toxicity tests showed no significant toxic effects attributable to the test substance, with absence of toxic symptoms or mortality and normal weight increment, food consumption, haematology, biochemistry, organs relative weight and histopathological examination of organs and tissues.
Rev. Toxicol. (2005) 22: 175-179 Toxicidad aguda oral y subcrónica en ratas de un extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenuiflorum L Lagarto* A, Tillán J, Bueno V, Chávez I, Guerra I, Vega Y, Valdés O y Gabilondo T Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos. CIDEM. Departamento Investigaciones Biológicas. 17 No. 6208 e/ 62 y 64 Playa, Ciudad de La Habana, Cuba * Lic. Ciencias Farmacéuticas. Investigador aspirante Recibido 15 de Abril de 2004 / Aceptado 18 de Octubre de 2004 Resumen: El potencial tóxico de un extracto acuoso liofilizado fue evaluado mediante el ensayo de toxicidad aguda oral y subcrónica a 90 días en ratas Wistar de ambos sexos. Los métodos empleados fueron los descritos por las normas OECD. En el ensayo agudo se administró por vía oral la dosis de 2000 mg/kg y en el ensayo subcrónico 250, 500 y 1000 mg/kg/día durante 13 semanas. Se evaluaron los signos tóxicos y peso corporal en ambos ensayos. En el estudio subcrónico además se evaluó el consumo de alimentos, indicadores hematológicos (hemoglobina, hematocrito, recuento diferencial de leucocitos, recuento total de leucocitos y recuento total de eritrocitos) y bioquímica clínica (glucosa, alanino amino transferasa, aspartato amino transferasa, colesterol, urea, bilirrubina y creatinina). También se realizó necropsia y examen histopatológico de órganos y tejidos (corazón, riñón, hígado, bazo, cerebro, pulmón, estómago, intestino, timo, glándulas suprarrenales, tiroides, paratiroides, páncreas, glándulas salivales, ganglio cervical, testículos, vesículas seminales, próstata y ovarios) y se determinó el peso relativo de órganos (corazón, riñón, hígado, bazo, cerebro, pulmón, timo, glándulas suprarrenales, próstata, testículos y ovarios). No se apreciaron signos tóxicos ni mortalidad como consecuencia de la administración del liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. en ninguno de los ensayos. Los parámetros analizados de peso corporal, consumo de alimentos, hematología, bioquímica, peso relativo de órganos y análisis histopatológico de órganos y tejidos no evidenciaron toxicidad significativa atribuible a la sustancia de prueba. Palabras clave: Ocimum teniuflorum L., toxicidad aguda y subcrónica, ratas Wistar. Abstract: Acute and subchronic oral toxicity in rats of a lyophilized aqueous extract of Ocimum tenuiflorum L. The toxic potential of a lyophilized aqueous extract was evaluated by oral acute and 90 days subchronic toxicity in Wistar rats of both sexes. The methods used were those described by OECD guidelines. In an oral acute toxicity test, a dose of 2000 mg/kg and for subchronic toxicity test, doses of 250, 500 and 1000 mg/kg/day for 13 weeks were administered. The toxic signs and corporal weight were evaluated for both assays. In addition, in subchronic toxicity test, the food consumption, haematology (haemoglo- bin, haematocrit, erythrocyte count, total and differential leucocyte count) and clinical biochemistry determination (glucose, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, cholesterol, urea nitrogen, total bilirubin and creatinine) were evaluated. Gross necropsy and histopathological examination of organs and tissues (heart, kidney, liver, spleen, brain, lung, stomach, intestine, thymus, adrenals, thyroid/parathyroid, pancreas, salivary glands, cervical ganglion, testicles, seminal vesicles, prostate and ovaries) were carried out and relative weight of each organ was determined (heart, kidney, liver, spleen, brain, lung, thymus, adrenals, prostate, testicles and ovaries). Oral acute and subchronic toxicity tests showed no significant toxic effects attributable to the test substance, with absence of toxic symptoms or mortality and normal weight increment, food consumption, haematology, biochemistry, organs relative weight and histopathological examination of organs and tissues. Keywords: Ocimum teniuflorum L., acute and subchronic toxicity, rats. Introducción Ocimum tenuiflorum L. es una planta de la familia Lamiaceae conocida popularmente como albahaca morada. Se considera nativa de Cuba, siendo muy común su empleo en la medicina tradicional cubana como hipoglicemiante. Los primeros estudios de esta como hipoglicemiante se realizaron en la década de los 50 [1]. Las partes aéreas se usan popularmente en forma de decocción por vía oral como anticatarral, para bajar la fiebre, dolores de cabeza y estómago y como hipoglicemiante. En estudios de tamizaje fitoquímico se ha identificado la presencia de aminas, flavonoides, leuco-antocianinas, esteroles y triterpenos [2]. Se han realizado estudios farmacológicos preclínicos y clínicos donde se ha demostrado las propiedades hipoglicemiantes de esta planta [3-5]. Existen pocos estudios acerca de la toxicidad potencial de Ocimum tenuiflorum L. Con el extracto hidroalcohólico al 70 % se obtuvo una dosis letal media en ratones por vía oral de 1540 mg/kg, clasificándose como dañino. Frente al bioensayo empleando Artemia salina se obtuvo una concentración letal media (CL50) de 18,75 µg/mL [6]. 175 Correspondencia: Fax: (537) 33 5556. E-mail: cinfa@infomed.sld.cu. Lagarto, A, Tillán, J, Bueno, V, Chávez, I, Guerra, I, Vega, Y, Valdés, O, Gabilondo, T En nuestro centro se proyecta obtener una formulación hipoglicemiante a partir del extracto acuoso de Ocimum tenuiflorum L. para su empleo clínico. Por tanto, emprendimos el trabajo de evaluar la toxicidad del liofilizado obtenido a partir del extracto acuoso a través del ensayo de toxicidad aguda oral y subcrónica en ratas. Materiales y métodos Sustancia de prueba Se empleó un extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. obtenido a partir del follaje de la planta. El material vegetal fue recolectado en la Estación Experimental de Plantas Medicinales “Juan Tomás Roig” (EEPM) en primavera, con Nº de herbario 0019 y secado a 40ºC en estufa de recirculación de aire. El extracto acuoso fue preparado reflujando 100 g de material vegetal con 1L de agua destilada durante 15 min y preservando con metilparabeno 0,2 % y propilparabeno 0,02 %. El perfil cromatográfico fue caracterizado por cromatografía de capa delgada. Posteriormente el extracto acuoso fue sometido a un proceso de liofilización empleando para ello una liofilizadora Edward. Animales Para el ensayo de toxicidad aguda oral se emplearon ratas Wistar de ambos sexos, con peso corporal entre 150 y 200 g, a los cuales se les retiró la comida 16 h antes de la administración. En el estudio subcrónico se emplearon 90 ratas Wistar, 45 hembras y 45 machos, con peso corporal de 100 ± 20 g. Todos procedentes de la UCTB Control Biológico (CIDEM). Los animales se mantuvieron en una sala con temperatura controlada de 22 ± 2ºC y ciclo luz - oscuridad de 12/12 horas, permaneciendo 10 animales por jaula. Todos los animales fueron examinados clínicamente antes del ensayo por un especialista que certificó su estado de salud. La alimentación consistió en dieta standard para ratas y ratones CMO-1000 proveniente del Centro para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB) y agua a voluntad. Todos los ensayos fueron realizados de acuerdo a las Buenas Prácticas de Laboratorio. Toxicidad aguda oral Se realizó mediante el método de la clase tóxica aguda [7], administrando una dosis de 2000 mg/kg a tres animales de cada sexo empleando cánula intragástrica. Para esto se reconstituyó el liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. en agua destilada al 10% (p/v), y se administró por vía oral 20 mL/kg de peso corporal del extracto reconstituido. Se registró el peso corporal semanalmente y los signos tóxicos diariamente, permaneciendo en observación los animales durante 14 días, al cabo de los cuales se realizó la necropsia y la observación macroscópicas de órganos y tejidos fundamentales (corazón, riñón, bazo, pulmón, hígado, ovarios). De acuerdo a los resultados obtenidos el liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. se clasificó según las clases de toxicidad [8]. Toxicidad subcrónica oral por 90 días El ensayo se llevó a cabo según lo establecido por la OECD para este tipo de estudio [9]. Se confeccionaron 10 grupos de trata176 miento (5 grupos hembras y 5 grupos machos) a razón de 10 animales por grupo, exceptuando el grupo centinela que se conformó con 5 animales de cada sexo. Se administraron 3 dosis, una mínima, una media y una máxima, teniendo en cuenta los resultados del estudio toxicológico agudo. Los grupos fueron: control que no recibió tratamiento, tratado con 250 mg/kg/día, tratado con 500 mg/kg/día, tratado con 1000 mg/kg/día y centinela que recibió la dosis de 1000 mg/kg/día. Antes de comenzar el ensayo se realizó extracción sanguínea del plexo ocular para determinar valores basales hematológicos y bioquímicos. La administración se realizó por vía oral mediante cánula intragástrica durante 13 semanas, para lo cual se reconstituyó el liofilizado en agua destilada al 10% (p/v), y se administraron diariamente 2,5, 5 y 10 mL/kg de peso corporal para conseguir las dosis de 250, 500 y 1000 mg/kg/día, respectivamente. Al finalizar los 90 días de administración, se efectuó la obtención de muestras de sangre de los animales del plexo ocular empleando capilares para microhematocrito, con el objetivo de realizar el examen hematológico y los análisis de bioquímica clínica. Posteriormente se procedió al sacrificio de los animales bajo atmósfera de isofluorano para efectuar la extracción de los siguientes órganos: corazón, riñón, hígado, bazo, cerebro, pulmón, estómago, intestino (duodeno, yeyuno e íleon), timo, glándulas suprarrenales, tiroides, paratiroides, páncreas, glándulas salivales, ganglio cervical, testículos, vesículas seminales, próstata y ovarios, los cuales fueron examinados macroscópicamente y fijados en solución de formol al 10 % para el posterior estudio histopatológico. También se determinó el peso relativo de órganos (corazón, riñón, hígado, bazo, cerebro, pulmón, timo, glándulas suprarrenales, próstata, vesículas seminales, testículos y ovarios). El grupo centinela permaneció 28 días posteriores al período de administración sin tratamiento, al cabo de los cuales se procedió de igual forma que los restantes grupos experimentales. Exámenes hematológicos Se determinó hemoglobina utilizando kit diagnóstico Boehringer Mannheim, hematocrito mediante capilares para microhematocrito, recuento diferencial de leucocitos mediante frotis sanguíneo sobre portaobjeto, recuento total de leucocitos mediante cámara de Neubauer después de provocar lisis de los hematíes mediante HCl 0,1N y recuento total de eritrocitos empleando solución Gower [10-11]. Bioquímica clínica Las determinaciones se realizaron mediante kits diagnósticos de Boehringer Mannheim. Se determinó glucosa Lote 68171301, alanino amino transferasa (ALAT) Lote 68004501 y aspartato amino transferasa (ASAT) Lote 68176101, colesterol Lote 68218101, urea Lote 689332801, creatinina Lote 69517901, bilirrubina Lote 67895701. Las lecturas de la absorbancia se realizaron en un espectrofotómetro Spectronic Genesys 2. Análisis estadístico Los resultados se expresaron como la media ± desviación standard mediante el programa estadístico Microsoft Excel. Para Rev. Toxicol. (2005) 22: 175-179 Toxicidad de extracto de O. tenuiflorum L determinar diferencias significativas entre los grupos se realizó un análisis de varianza de una vía y un test de Duncan con posterioridad en los casos requeridos, tomando un nivel de significación de p<0,05 [12]. eritrocitos respecto a los datos basales. Igualmente se apreciaron alteraciones en los neutrófilos y linfocitos fundamentalmente en los grupos de los machos. Bioquímica clínica Los valores medios ± desviación standard obtenidos para cada grupo de tratamiento en ambos sexos al finalizar el estudio se observan en la Tabla 2, donde también se aprecia el rango de valores normales. Se apreciaron diferencias significativas respecto al grupo control en los niveles de glucosa, ALAT, ASAT, urea y bilirrubina. Análisis del peso relativo de órganos Los resultados del peso relativo de cada órgano por grupo de tratamiento para ambos sexos reflejó un aumento significativo de la próstata en el grupo tratado con la dosis de250 mg/kg/día respecto al control (p<0,05), en el resto de las dosis no se observó este efecto. Análisis histopatológico En todos los animales de los grupos control, Ocimum tenuiflorum 1000 mg/kg y centinela de ambos sexos se observaron indicios de neumonía intersticial en pulmón. En el grupo control (n=20) se observaron dos animales con nefritis y glomerulonefritis y un animal con atrofia glomerular de riñón en las hembras y en los machos un caso de glomerulonefritis y nefritis intersticial. Además en hígado se observó congestión centrolobulillar en una hembra y cuatro machos y un caso de hemorragia en los machos. El grupo administrado con la dosis de 1000 mg/kg de Ocimum tenuiflorum (n=18) presentó en los machos un caso de nefritis intersticial y glomerulonefritis y otro caso de hemorragia cortical y dilatación tubular en riñón. En hígado se observaron cinco hembras y seis machos que presentaron congestión centrolobulillar y dos machos con hemorragia. Resultados Toxicidad aguda oral En el ensayo de toxicidad aguda no se produjeron muertes ni signos tóxicos posteriores a la administración. El incremento de peso corporal se comportó estadísticamente similar en los grupos de ambos sexos respecto al grupo control. La necropsia no arrojó ninguna alteración macroscópica de los órganos y tejidos examinados. Toxicidad subcrónica por 90 días Durante el ensayo subcrónico no se presentó mortalidad en ninguno de los grupos controles. En los grupos restantes la mortalidad detectada fue debido a la administración por cánula intragástrica, ocurriendo dos muertes en las hembras de la dosis alta en la semana 5 (n=10), una en las hembras de la dosis media en la semana 12 (n=10) y otro en el grupo centinela de los machos en la semana 6 (n=5). Al analizar el comportamiento semanal del incremento del peso corporal y el consumo acumulativo de alimentos, para ambos sexos durante el período de tratamiento, se observó un incremento similar en todos los grupos de tratamiento respecto al control. La ganancia de peso estuvo relacionada con el consumo de alimentos. Hematología Los valores medios de los indicadores hematológicos por grupo de tratamiento para cada sexo pueden apreciarse en la Tabla 1, estos fueron comparados con los valores basales determinados en el muestreo inicial que también se muestran en la misma tabla. Se observaron alteraciones en los niveles de leucocitos y Tabla 1. Indicadores hematológicos±desviación standard para cada tratamiento al finalizar el estudio y datos basales (antes del tratamiento). Machos Datos basales Control (n=10) 250 mg/kg/día (n=10) 500 mg/kg/día (n=10) 1000 mg/kg/día (n=10) Centinela (n=9) Hembras Datos basales Control (n=10) 250 mg/kg/día (n=10) 500 mg/kg/día (n=9) 1000 mg/kg/día (n=10) Centinela (n=10) Hemoglobina (mmol/L) Hematocrito (%) Contaje diferencial (%) Neutrófilos Linfocitos Leucocitos (celulas/mm3) Eritrocitos (x 103 células) 6,97 - 9,55 9,29±1,50 9,48±0,79 8,81±0,55 8,85±0,52 8,87±0,22 37,28 - 46,12 45,00±4,46 45,67±2,36 47,00±1,52 48,67±1,32 45,75±1,55 14,68 - 29,42 39,30±15,51 27,50±6,65 19,50±9,37** 20,50±9,68* 42,50±15,11 70,58 - 85,31 60,70±15,51 72,50±6,65 80,50±9,37** 79,60±9,74* 57,50±15,11 4906,43 - 7879,69 12175,00±1958,92 12215,00±3026,28 11794,44±1298,42 9825,00±2620,25 9062,50±1155,69 2124,44 - 3976,16 4793,00±704,2 5110,00±551,90 4957,80±872,40 4980,00±549,6 5932,50±72,30 7,34 - 9,81 9,06±0,65 8,84±0,57 9,54±1,04 9,43±0,44 8,90±0,19 41,02 - 46,60 48,72±4,91 50,20±7,04 46,33±1,00 49,38 6,07 44,10±2,10 12,97 - 25,03 21,50±7,18 27,10±7,85 30,78±4,29 22,13±9,28 42,20±11,19 ** 69,83 - 87,22 78,50±7,18 72,90±7,85 69,22±4,29 76,75±9,85 57,20±11,97 ** 3559,49 - 9661,35 10183,33±1931,32 11135,00±2229,85 8755,56±890,73 10175,00±3162,16 8660,00±803,13 2558,49-4476,51 4485,60±503,10 5084,40±626,80 4684,40±467,50 5171,30±435,00 5434,00±712,60 *p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001. Rev. Toxicol. (2005) 22: 175-179 177 Lagarto, A, Tillán, J, Bueno, V, Chávez, I, Guerra, I, Vega, Y, Valdés, O, Gabilondo, T Tabla2. Indicadores bioquímicos±desviación standard para cada tratamiento al finalizar el estudio y datos basales (antes del tratamiento). ALAT (U/L) Machos Datos basales 25,18 - 48,01 Control (n=10) 10,42±11,03 250 mg/kg/día (n=10) 11,60±7,64 500 mg/kg/día (n=10) 7,96±4,75 1000 mg/kg/día (n=10) 13,11±12,29 Centinela (n=9) 55,09±11,95*** ASAT (U/L) Colesterol (mmol/L) Glucosa (mmol/L) Creatinina (µmol/L) Urea (mmol/L) Bilirrubina (µmol/L) 49,23 - 95,01 15,14±15,61 26,39±22,30 14,48±8,28 25,81±27,40 106,93±23,52*** 2,18 - 3,66 1,18±0,69 1,73±0,97 0,60±0,24 0,82±0,64 1,59±0,19 0,95 - 6,69 4,22±2,57 3,75±1,67 2,95±1,40 4,24±1,79 4,31±2,22 0 - 148,56 85,95±25,99 25,18±15,75 69,59±75,50 36,32±26,34 31,26±18,08 8,85 - 15,59 0 - 2,54 11,26±4,75 7,09±2,44 13,05±6,04 13,26±1,86* 9,95±4,42 4,22±1,50 11,18±2,82 3,05±1,66 10,25±0,89 2,47±0,50*** Hembras Datos basales 21,43 - 49,01 Control (n=10) 11,43±8,66 250 mg/kg/día (n=10) 9,96±8,92 500 mg/kg/día (n=9) 26,50±7,07* 1000 mg/kg/día (n=10) 11,16±6,87 Centinela (n=10) 43,92±13,80*** *p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001. 49,16 - 87,32 20,68±16,77 34,66±24,44 41,19±9,34 32,64±27,62 76,88±21,91* 1,95 - 3,71 1,61±0,85 2,08±0,85 1,70±0,65 1,94±1,21 1,45±0,50 2,95 - 6,59 3,10±0,86 4,46±1,42 7,71±1,11*** 6,27±2,40** 4,38±1,73 0 - 167,95 26,24±19,00 29,76±18,60 47,58±28,81 24,40±13,51 13,65±16,81 9,46 - 18,36 10,20±3,40 14,44±2,44 12,14±1,27 18,78±6,34** 10,70±0,95 0 - 5,04 8,84±4,56 3,63±1,81 4,59±2,93 7,77±5,35 3,44±0,46 En el grupo centinela (n=9) se observó en los machos un animal con un foco de nefrosis en riñón y en las hembras un caso de nefritis y glomerulonefritis en riñón. En hígado se presentaron tres casos en hembras y dos en machos con congestión centrolobulillar. Discusión El liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. se enmarca en la categoría de no clasificado de acuerdo a las Clases de Toxicidad de la Comunidad Europea ya que no se observó mortalidad ni signos tóxicos atribuibles a la administración de la sustancia de prueba a la dosis de 2000 mg/kg. De acuerdo a este resultado podemos afirmar que el extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. no produjo toxicidad significativa a la dosis límite en el ensayo de toxicidad aguda. En el ensayo de toxicidad subcrónica tampoco se observaron signos tóxicos ni mortalidad, comportándose el peso corporal en correspondencia con el consumo de alimentos. Se observaron alteraciones en los parámetros hematológicos (neutrófilos y linfocitos / 500 y 1000 mg/kg/día), y bioquímicos (glucosa / 500 y 1000 mg/kg/día y urea / 1000 mg/kg/día) los cuales pueden ser indicativos de un posible efecto tóxico derivado de la administración del liofilizado de Ocimum tenuiflorum L., aunque las mismas no se produjeron en ambos sexos por igual. Los valores incrementados de leucocitos y eritrocitos respecto a los datos basales, comportamiento que ocurrió por igual en todos los grupos experimentales, puede atribuirse a la ocurrencia de algún proceso infeccioso; también las alteraciones histopatológicas encontradas en pulmón indican la presencia de neumonía intersticial, lo cual puede deberse a la manipulación que conlleva la administración intragástrica. En el grupo control de los machos se observó leucocitocis al comparar con los datos basales, encontrándose los neutrófilos aumentados y los linfocitos disminuidos. Este tipo de alteración se manifiesta generalmente ante una infección aguda causada por invasores bacterianos. En los grupos tratados con las tres 178 dosis de Ocimum tenuiflorum L. los neutrófilos sufrieron una disminución hasta los niveles basales, aumentando igualmente los niveles de linfocitos, lo cual pudiera deberse a la administración de la sustancia de prueba. Además en el grupo centinela se observa nuevamente aumento de neutrófilos y disminución de linfocitos. La literatura reporta que la decocción de Ocimum tenuiflorum L. ha mostrado actividad antiviral, antimicrobiana, antimicótica, inmunoestimulante y antituberculosa [1]. En estudios preclínicos se ha reportado el efecto inmunoestimulante en ratas albinas tras la administración oral por 10 días del extracto acuoso y metanólico [14]. Los aceites esenciales han mostrado actividad antimicrobiana en tuberculosis y S. aureus. El incremento de los niveles de glucosa en las hembras de los grupos tratados con las dosis de 1000 y 500 mg/kg/día respecto al grupo control, pudiera sugerir que a dosis altas se produzca un efecto contrario al hipoglicemiante reportado [4]. En el grupo centinela se observa la regresión de este efecto. No obstante este es un punto en el que se debe profundizar en estudios posteriores. El efecto hipoglicemiante de esta planta se ha estudiado desde los años 50 [1]. Diversos estudios preclínicos y clínicos han demostrado las propiedades hipoglicemiantes de esta planta [35]. En un ensayo clínico a doble ciego efectuado con 40 voluntarios con diabetes tipo II durante cuatro semanas, donde se administró una dosis de 2,5 g de polvo de hojas o placebo durante dos semanas, se obtuvo una reducción del 17,6 % de los niveles de glucosa en ayunas y 7,3 % en glucosa postpandrial de los pacientes tratados con Ocimum tenuiflorum L comparado con el grupo placebo [15]. En la literatura revisada no se reportan este tipo de efecto encontrado con la glicemia a altas dosis. La urea incrementada en el grupo tratado con la dosis de 1000 mg/kg/día en las hembras no sobrepasa los valores basales y el valor obtenido para el grupo centinela fue muy similar al del grupo control. Las alteraciones histopatológicas encontradas en riñón fue de similar incidencia para los grupos tratados y control (control 20%, dosis alta 11%, centinela 22%). Estas pueden deberse a Rev. Toxicol. (2005) 22: 175-179 Toxicidad de extracto de O. tenuiflorum L lesiones espontáneas, de las cuales la más común e importante en roedores es la nefropatía crónica. Esta lesión comienza entre los 3 y 6 meses de edad y se manifiesta a través de túbulos renales basofílicos, ensanchamiento de las membranas de los glomérulos, fibrosis intersticial, focos de infiltrados celulares y glomerulosclerosis. La patogénesis se relaciona con la pérdida de proteínas tras el aumento de porosidad de la membrana basal [16]. Las alteraciones de tipo congestivo reportadas en hígado tanto en los grupos tratados como control pudieran deberse a un descenso del reflujo sanguíneo secundario al estasis venoso en el sacrificio. Estos cambios se producen fundamentalmente por la anoxia que sufren las células y por la irritación prolongada del estasis. En un órgano parenquimatoso como el hígado se puede manifestar como hemorragias y congestión centrolobulillar entre otros [17]. Según los resultados obtenidos en los estudios toxicológicos, podemos concluir que el extracto acuoso liofilizado de Ocimum tenuiflorum L. no mostró toxicidad significativa en el ensayo agudo. La administración subcrónica de hasta 1000 mg/kg/día no provocó efectos tóxicos significativos reflejándose un comportamiento normal de ganancia de peso, consumo de alimentos y ausencia de signos tóxicos y mortalidad atribuible a la sustancia de prueba. Por otra parte se observó un aumento de los niveles de urea en las hembras a la dosis de 1000 mg/kg/día y de glucosa con las dosis de 500 y 1000 mg/kg/día, lo que pudiera indicar que a altas dosis se produce un efecto contrario al farmacológico reportado. La administración de la dosis de 250 mg/kg/día (NOEL) no mostró alteraciones sobre estos indicadores, siendo similares a los observados en el grupo control. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. Bibliografía 1. Gupta MP - Editor (1995) 270 Plantas Medicinales Iberoamericanas. CYTED-SECAB: Santafé de Bogotá, pp 322-324. 2. Roig JT (1988) Plantas medicinales aromáticas o venenosas de Cuba. Tomo I. 1ª ed. Editorial Científico Técnica: La Habana, Cuba, pp 134. 3. 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